Teknikk for bestemmelse av blodgruppen i henhold til Avo-systemet

ABO-blodgruppesystemet består av to gruppe agglutinogener - A og B og to tilsvarende plasmagglutininer - alfa (anti-A) og beta (anti-B). Ulike kombinasjoner av disse antigenene og antistoffene danner fire blodgrupper: gruppe 0 (1) - begge antigenene er fraværende; gruppe A (II) - bare antigen A er til stede på røde blodlegemer; gruppe B (III) - bare antigen B er til stede på røde blodlegemer; gruppe AB (IV) - antigener A og B er til stede på røde blodlegemer.

Det unike med ABO-systemet ligger i det faktum at i ikke-immuniserte menneskers plasma er det naturlige antistoffer mot antigenet som er fraværende på røde blodlegemer: hos individer i gruppe 0 (1), antistoffer mot A og B; hos individer i gruppe A (II) - anti-B antistoffer; hos personer i gruppe B (III) - anti-A antistoffer; individer i gruppe AB (IV) har ikke antistoffer mot antigener i ABO-systemet.

I den følgende teksten vil anti-A og anti-B antistoffer bli referert til som anti-A og anti-B.

Bestemmelsen av ABO-blodgruppen utføres ved å identifisere spesifikke antigener og antistoffer (dobbel eller kryssreaksjon). Anti-A og anti-B blir påvist i blodserum ved bruk av røde blodlegemer A (II) og B (III). Tilstedeværelsen eller fraværet av antigener A og B på røde blodlegemer bestemmes ved bruk av monoklonale eller polyklonale antistoffer (standard hemagglutinerende sera) med tilsvarende spesifisitet.

Bestemmelse av blodtype blir utført to ganger: den første studien er i behandlingsavdelingen (blodpreparatsteam); konfirmantforskning - i laboratoriavdelingen. Algoritmen for å utføre immunohematologiske laboratorietester for blodoverføring er presentert i fig. 18.1.

Resultatet av bestemmelse av blodgruppen registreres i øvre høyre hjørne av forsiden av sykehistorien eller i en donorjournal (kort) som indikerer datoen og signeres av legen som foretok avgjørelsen.

I nord-vest for Russland er fordelingen av blodgrupper i ABO-systemet i befolkningen som følger: gruppe 0 (I) - 35%; gruppe A (II) - 35-40%; gruppe B (III) - 15-20%; gruppe AB (IV) - 5-10%.

Det skal bemerkes at det er forskjellige typer (svake varianter) av både antigen A (i større grad) og antigen B. De vanligste typene antigen A - A1 og A2. Utbredelse av Antigen A1 hos individer i gruppe A (II) og AB (IV) er 80%, og antigen A2 - omtrent 20%. Blodprøver med a2 kan inneholde anti-A1-antistoffer [2% i blodgruppe A2(II) og 30% i gruppe A2I (IV)], samhandling med standard røde blodlegemer i gruppe A (II). Tilstedeværelsen av anti-A1 oppdaget ved kryssbestemmelse av blodgrupper og ved gjennomføring av tester for individuell kompatibilitet.

For den differensierte bestemmelsen av antigen A-varianter (A1 og A2) det er nødvendig å bruke spesifikke reagenser (fytohemagglutininer eller anti-A monoklonale antistoffer1. Gruppe A pasienter2(II) og A2I (IV) må erytrocyttholdige hemokomponenter av henholdsvis gruppe A overføres2(II) og A2I (iv). Overføring av vasket røde blodlegemer kan også anbefales: 0 (I) - for pasienter med blodgruppe A2(Ii); 0 (I) og B (III) - for pasienter med blodgruppe A2I (II).

Tabell 18.4. Resultater av ABO-blodtypebestemmelse
ForskningsresultaterTest blodgruppe
røde blodlegemer med reagensserum (plasma) med standard røde blodlegemer
anti-abanti-enanti-b0 (I)A (II)I (III)
----++0 (I)
++---+A (II)
+-+-+-I (III)
+++---AB (IV)
Betegnelser: + - tilstedeværelsen av agglutinasjon, - - fraværet av agglutinasjon

Bestemmelse av blodgruppetilhørighet i henhold til ABO-system

Blodgrupper bestemmes ved standard sera (enkel reaksjon) og standard røde blodlegemer (dobbel eller kryssreaksjon).

Blodgruppen bestemmes av en enkel reaksjon med to serier av standard isohemagglutinerende serum..

    Definisjon fremgang [vis].

Bestemmelsen av blodgruppen utføres i godt lys og ved en temperatur på +15 til + 25 ° C på tablettene. 0 (1) er skrevet på venstre side av nettbrettet, A (II) i midten og B (III) på høyre side. Midt på den øvre kanten av nettbrettet noteres giverens etternavn eller antall testblod. Bruk aktivt standardserum av tre grupper (O, A, B) med en titer på minst 1:32, to serier. Serumer plasseres i spesielle stativer i to rader. Hvert serum tilsvarer en merket pipette. For ytterligere kontroll, bruk serumgruppe AB (IV).

En eller to dråper standard serum i to rader påføres tabletten: serum fra gruppe 0 (1) til venstre, serum fra gruppe A (II) i midten, serum fra gruppe B (III) til høyre..

Dråper blod fra en finger eller prøverør påføres med en pipette eller glassstang nær hver dråpe serum og blandes med en pinne. Mengden blod skal være 8-10 ganger mindre enn serum. Etter blanding vippes platen eller tabletten forsiktig i hendene, noe som bidrar til en raskere og tydelig agglutinering av røde blodlegemer. Når agglutinering skjer, men ikke tidligere enn etter 3 minutter, tilsett en dråpe 0,9% natriumkloridoppløsning til dråpene med serum med røde blodlegemer, der agglutinasjon har skjedd, og fortsett å overvåke til det har gått 5 minutter. Etter 5 minutter les reaksjonen i overført lys.

Hvis agglutineringen er uklar, tilsettes en dråpe 0,9% natriumkloridoppløsning i tillegg til serum- og blodblandingen, hvoretter de gir en konklusjon om gruppetilhørigheten (tabell 18.4).

  1. Fraværet av agglutinering i alle tre dråper indikerer at det ikke er noe agglutinogen i testblodet, det vil si at blodet tilhører gruppe 0 (I).
  2. Inntreden av agglutinasjon i dråper med serum 0 (I) og B (III) indikerer at det er agglutinogen A i blodet, det vil si blod tilhører gruppe A (II).
  3. Tilstedeværelsen av agglutinasjon i dråper med serum i gruppe 0 (I) og A (II) indikerer at det er agglutinogen B i testblodet, det vil si blod fra gruppe B (III).
  4. Agglutinering i alle tre dråper indikerer tilstedeværelsen av agglutinogener A og B i testblodet, det vil si at blod tilhører gruppe AB (IV). Imidlertid, i dette tilfellet, gitt at agglutinering med alle sera er mulig på grunn av en uspesifikk reaksjon, er det nødvendig å påføre to eller tre dråper standard serum av gruppe AB (IV) på en tablett eller plate og tilsette en dråpe testblod til dem. Serum og blod blandes, og resultatet av reaksjonen blir observert i 5 minutter.

Hvis agglutinasjon ikke har skjedd, blir testblodet henvist til gruppe AB (IV). Hvis det vises agglutinering med serum fra gruppe AB (IV), er reaksjonen uspesifikk. Ved svak agglutinasjon og i alle tvilstilfeller, blir blodet kontrollert på nytt med standard serum fra andre serier.

ABO-bestemmelse av blodtype ved dobbel reaksjon
(for standard sera og standard røde blodlegemer)

Standard røde blodlegemer er en 10-20% suspensjon av ferske naturlige røde blodlegemer (eller testceller vasket fra et konserveringsmiddel) fra gruppe 0 (I), A (II) og B (III) i en 0,9% natriumkloridoppløsning eller sitrat-saltoppløsning. Native standard røde blodlegemer kan brukes i 2-3 dager forutsatt at de lagres i isoton saltvann ved en temperatur på + 4 ° C. Hermetiserte røde blodlegemer lagres ved en temperatur på + 4 ° C i 2 måneder og vaskes fra konserveringsløsningen før bruk.

Ampuller eller hetteglass med standard sera og standard røde blodlegemer plasseres i spesielle stativer med tilsvarende merking. For å jobbe med å skrive reagenser, bruk renseripipetter, skill for hvert reagens. For vasking av glasspinner og -pipetter fremstilles glass med 0,9% natriumkloridløsning.

For å bestemme gruppen ta 3-5 ml blod i et reagensglass uten stabilisator. Blodet skal stå i 1,5-2 timer ved en temperatur på + 15-25 ° C.

    Definisjon fremgang [vis].

To dråper (0,1 ml) av standard serumgrupper 0 (I), A (II), B (III) av to serier påføres tabletten. Følgelig har hver gruppe sera en liten dråpe (0,01 ml) standard røde blodceller fra gruppene 0 (I), A (II), B (III). En dråpe testblod tilsettes standard serum, og to dråper testserum til standard erytrocytter. Mengden blod skal være 8-10 ganger mindre enn serum. Dråpene blandes med en glassstang, og rister tabletten i hendene i 5 minutter, overvåker begynnelsen av agglutinering. Hvis agglutinasjonen er uklar, tilsettes en dråpe 0,9% natriumkloridoppløsning (0,1 ml) i tillegg til serum- og blodblandingen, hvoretter en konklusjon blir gjort om gruppetilhørigheten (tabell 18.4).

  1. Tilstedeværelsen av agglutinering med standard røde blodlegemer A og B og fraværet av agglutinering i tre standardserum i to serier indikerer at både agglutininer, alfa og beta, er til stede i testserumet, og det er ingen agglutinogener i de undersøkte røde blodlegemene, dvs. blod tilhører gruppe 0 (I).
  2. Tilstedeværelsen av agglutinering med standard serum fra gruppe 0 (I), B (III) og med standard erytrocytter fra gruppe B (III) indikerer at det er agglutinogen A i de undersøkte røde blodlegemene, og agglutinin beta i testserumet. Derfor hører blod til gruppe A (II).
  3. Tilstedeværelsen av agglutinering med standard serum fra gruppe 0 (I), A (II) og med standard erytrocytter fra gruppe A (II) indikerer at det er agglutinogen B i de undersøkte røde blodlegemene, og agglutinin alfa i testserumet. Derfor hører blod til gruppe B (III).
  4. Tilstedeværelsen av agglutinering med alle standard serum og fraværet av agglutinering med alle standard røde blodlegemer indikerer at begge agglutininer er til stede i de undersøkte røde blodlegemene, dvs. blod tilhører gruppe AB (IV).

Bestemmelse av blodgruppetilhørighet
ved bruk av sykloner anti-A og anti-B

Anti-A og anti-B syklokloner (monoklonale antistoffer mot antigener A og B) er designet for å bestemme blodgruppen til et humant ABO-system i stedet for standard isohemagglutinerende sera. For hver blodtypebestemmelse brukes en serie anti-A og anti-B reagens..

    Definisjon fremgang [vis].

Én stor dråpe anti-A og anti-B sykloniske sykloner (0,1 ml) blir påført tabletten (platen) under de tilhørende påskriftene: “Anti-A” eller “Anti-B”. En liten dråpe testblod plasseres ved siden av hverandre (blodreagensforholdet er 1:10), deretter blandes reagenset og blodet og reaksjonsforløpet blir observert når tabletten eller platen er svakt berget..

Agglutinering med anti-A og anti-B sykloniske kloner skjer vanligvis i de første 5-10 sek. Observasjon bør utføres 2,5 minutter på grunn av muligheten for et senere utbrudd av agglutinasjon med røde blodlegemer som inneholder svake varianter av antigener A eller B.

Ved mistanke om spontan agglutinering hos personer med blodgruppe AB (IV), blir det utført en kontrollstudie med en 0,9% oppløsning av natriumklorid. Reaksjonen må være negativ..

De anti-A (rosa) og anti-B (blå) koliklonene er tilgjengelige i både naturlig og lyofilisert form i ampuller på 20, 50, 100 og 200 doser med et løsningsmiddel festet til hver ampulle, 2, 5, 10 Henholdsvis 20 ml.

En tilleggskontroll av riktig bestemmelse av ABO-blodgruppen med anti-A og anti-B-reagenser er det anti-AB monoklonale reagenset (Hematologist, Moskva). Det anbefales å bruke anti-AB-reagenset parallelt med både immunpolyklonale sera og monoklonale reagenser. Som et resultat av reaksjonen med anti-AB-reagens, utvikles agglutinering av erytrocytter fra gruppene A (II), B (III) og AB (IV); gruppe 0 (I) røde blodlegemer har ingen agglutinasjon.

FEIL I Å BESTEMME GRUPPETILBEHØR

Feil i bestemmelse av blodgrupper kan avhenge av tre grunner:

  1. teknisk;
  2. mindreverdighet av standard sera og standard røde blodlegemer;
  3. biologiske trekk ved testblodet.

Feil av tekniske årsaker inkluderer:

  • a) feil plassering av sera på nettbrettet;
  • b) ukorrekte kvantitative forhold mellom serum og røde blodlegemer;
  • c) bruk av utilstrekkelig rene tabletter og andre gjenstander i kontakt med blod. Hvert serum skal ha en egen pipette; for vasking av pipetter skal det kun brukes 0,9% natriumkloridløsning;
  • d) feil registrering av testblodet;
  • e) ikke overholdelse av tiden som er satt for agglutineringsreaksjonen; i all hast, når reaksjonen tas i betraktning før utløpet av 5 minutter, kan det hende at agglutinasjon ikke forekommer hvis det er svake agglutinogener i testblodet; hvis reaksjonen er overeksponert i mer enn 5 minutter, kan tørking av dråpene fra kantene forekomme, som simulerer agglutinering, noe som også vil føre til en feilaktig konklusjon;
  • f) mangel på agglutinasjon på grunn av den høye (over 25 ° C) omgivelsestemperatur. For å unngå denne feilen anbefales det å bruke spesiallagde serum for arbeid i varmt klima; for å bestemme blodgrupper på en plate eller plastbrett, hvis ytre overflate av bunnen er dyppet i kaldt vann.
  • g) feil sentrifugering: utilstrekkelig kan føre til et falskt negativt resultat, og overdreven kan føre til en falsk positiv.

Feil som er avhengig av bruken av mangelfulle standardsera og røde blodlegemer:

  • a) svak standard sera med en titer lavere enn 1:32 eller med en utløpt holdbarhet kan forårsake sen og svak agglutinering;
  • b) bruk av uegnet standard sera eller røde blodceller, som ble tilberedt unsterile og utilstrekkelig bevart, fører til forekomst av uspesifikk "bakteriell" agglutinasjon.

Feil som avhenger av testblodets biologiske egenskaper:

Feil som avhenger av de biologiske egenskapene til de undersøkte røde blodlegemene:

    a) sen og svak agglutinering forklares med "svake" former for antigener, erytrocytter, oftere på grunn av tilstedeværelsen av svak agglutinogen A i gruppe A og AB2. I dette tilfellet, i tilfelle å bestemme en blodgruppe uten å undersøke serum for tilstedeværelse av agglutininer (en enkel reaksjon), kan det oppstå feil som skyldes at blodet i gruppe A2B er definert som gruppe B (III), og blod A2 - som gruppe 0 (I). Derfor, for å unngå feil, må bestemmelsen av blodgruppen til både givere og mottakere utføres ved bruk av standard røde blodlegemer (dobbel eller kryssreaksjon). For identifisering av agglutinogen A2 Det anbefales å gjenta studien med andre typer (serier) reagenser, ved bruk av forskjellige laboratorieglassvarer, med en økning i reaksjonsregistreringstiden.

Spesifikke reagenser for raffinering av blodgrupper i nærvær av svake varianter av antigen A (A1, OG2, OG3) metoden for direkte agglutineringsreaksjon er tsikolikon anti-Acl og anti-A reagens).

b) "panagglutination" eller "autoagglutination", det vil si blodets evne til å produsere den samme uspesifikke agglutinasjonen med alle serum og til og med dets eget. Etter 5 minutter svekkes intensiteten av en slik reaksjon, mens ekte agglutinasjon intensiveres. Det finnes oftest hos hematologiske, onkologiske pasienter, kalsinert osv. For kontroll anbefales det å vurdere om de testede røde blodlegemene agglutinerer i standard serum fra gruppe AB (IV) og fysiologisk saltvann.

Blodgruppen med "panagglutination" kan bestemmes etter vask av de røde blodlegemene tre ganger. For å eliminere uspesifikk agglutinering blir tabletten plassert i en termostat ved en temperatur på + 37 ° C i 5 minutter, hvoretter den uspesifikke agglutinasjonen forsvinner, og den sanne forblir. Det anbefales å gjenta bestemmelsen ved bruk av monoklonale antistoffer, Coombs-test.

I tilfelle når vasking av røde blodlegemer ikke gir ønsket resultat, er det nødvendig å ta blodprøven på nytt i et forvarmet rør, plassere prøven i en termisk beholder for å opprettholde temperaturen på + 37 ° C og levere den til laboratoriet for forskning. Bestemmelsen av blodgruppen må utføres ved en temperatur på + 37 ° C, for hvilken det brukes forvarmede reagenser, saltvann og en tablett..

  • c) de røde blodcellene i testblodet er brettet inn i "myntsøyler", som kan forveksles med agglutinater med makroskopi. Tilsetningen av 1-2 dråper av en isotonisk natriumkloridløsning, etterfulgt av forsiktig sving av tabletten, ødelegger som regel "myntsøylene".
  • d) blandet eller ufullstendig agglutinasjon: en del av de røde blodlegemene agglutinerer, og en del forblir fri. Det observeres hos pasienter i gruppe A (II), B (III) og AB (IV) etter benmargstransplantasjon eller i løpet av de første tre månedene etter blodoverføring av gruppe 0 (I). Den perifere erytrocytt heterogeniteten i blodet er tydelig bekreftet i DiaMed-gel-testen.
  • Feil avhengig av de biologiske egenskapene til testserumet:

    • a) påvisning av antistoffer med en annen spesifisitet under rutinemessig testing er et resultat av tidligere sensibilisering. Det anbefales å bestemme spesifisiteten til antistoffer og velge typede røde blodlegemer uten antigenet som immunisering oppdages. En immunisert mottaker er pålagt å individuelt velge kompatibelt giverblod;
    • b) når detektering av dannelsen av "myntsøyler" av standard røde blodceller i nærvær av testserum, anbefales det å bekrefte det unormale resultatet ved bruk av røde blodceller fra gruppe 0 (I). For å skille mellom “myntsøyler” og ekte agglutinater tilsettes 1-2 dråper isoton natriumkloridløsning og tabletten ristes, mens “myntsøyler” blir ødelagt;
    • c) fravær av anti-A- eller anti-B-antistoffer. Kanskje hos nyfødte og pasienter med hemming av humoral immunitet;
    • d) agglutinering av standard røde blodlegemer, inkludert gruppe 0 (I) i nærvær av testserumet, er assosiert med nærvær av spesifikke og uspesifikke forkjølelsesantistoffer. Forsvinningen av agglutinering under studien ved en temperatur på + 37 ° C verifiserer ikke-spesifikke kalde agglutininer. Hvis testserumet samhandler med noen prøver av røde blodceller fra gruppe 0 (I), indikerer dette tilstedeværelsen av spesifikke forkjølelsesantistoffer i serumet. For å fastslå antistoffers spesifisitet utføres testing med et panel med røde blodceller skrevet av P, MNS, etc..

    Page 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Totalt antall sider: 10
    1. Immunologisk utvalg av en giver og mottaker under blodoverføringer, dets komponenter og benmargstransplantasjoner / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. et al. - Leningrad, 1979. - 29 s.
    2. Kaleko S.P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G.P. et al. Allosensitization under hemokomponentterapi og optimalisering av seleksjon av histokompatible par av giver-mottaker i militære medisinske institusjoner / Methodical. anbefalinger.- St. Petersburg, 1994.- 16 s.
    3. Praktisk transfusiologi / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. et al. - Moskva: Triad-T, 1996.-- 435 s..
    4. Guide to Military Transfusiology / Ed. E. A. Nechaev. - Moskva, 1991.-- 280 s.
    5. Veileder for transfusjonsmedisin / Ed. E.P. Swedentsova. - Kirov, 1999.- 716s.
    6. Rumyantsev A.G., Agranenko V.A. Clinical transfusiology.- M.: GEOTAR MEDICINE, 1997.- 575 p..
    7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt EB, Safe blodoverføring: en guide for leger. - St. Petersburg: Peter, 2000.- 320 s..
    8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryany N.B. Immunologisk og smittsom sikkerhet ved hemokomponentterapi.- SPb.: Nauka, 1998.- 232 s..
    9. Schiffman F.J. Patofysiologi av blod / Per. fra engelsk.- M.- SPb.: Forlag BINOM - Nevsky-dialekt, 2000.- 448 s..
    10. Blodoverføring i Clinical Medicine / Ed. P.L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988. - 1233 s.

    Kilde: Medisinsk laboratoriediagnostikk, programmer og algoritmer. Ed. prof. Karpishchenko A.I., St. Petersburg, Intermedica, 2001

    Metode for å bestemme blodgruppen til ABO-systemet

    Blodtypen bestemmes i et godt opplyst rom ved en temperatur på 15-25 ° C. Lavere eller høyere temperaturer kan forvrenge resultatene av studien. Skriv navn og initialer til pasienten, som bestemmer blodgruppen på tallerkenen eller tallerkenen. Deretter, i en sirkel eller fra venstre til høyre, er betegnelsene på blodgrupper skrevet: O (I), A (II), B (III). Under disse betegnelsene blir de tilsvarende seraene påført dråpevis. For serum fra hver gruppe, bruk en egen pipette. Tilsett blod fra pasienten til serum. Blod for å bestemme gruppen er hentet fra en finger eller øreflippen. Du kan også bruke røde blodlegemer som er igjen i prøverøret etter blodkoagulasjon og dannelse av en blodpropp. Det er nødvendig at mengden standard serum er omtrent 10 ganger større enn mengden blod tilsatt. Deretter blandes dråpene med separate glassstenger og man observerer en hemagglutineringsreaksjon i 5 minutter, vipp forsiktig av platen eller platen. Agglutinasjon kommer til uttrykk i utseendet til små røde klumper, som fra små gradvis smelter sammen til større. I dette tilfellet er serumet nesten fullstendig misfarget. Kanskje dannelse av falsk hemagglutinering enkel liming av røde blodlegemer. Derfor tilsettes en dråpe saltoppløsning etter 3 minutter til dråpene der agglutineringen skjedde. Hvis agglutinasjonen vedvarer etter 5 minutter, er det sant.

    Tolkning av resultatene. Ved bestemmelse av blodgruppen kan 4 mulige reaksjoner oppstå:

    1) agglutinering forekom ikke med noen av standardseraene; blod fra 1. gruppe - O (I);

    2) agglutinering skjedde med sera fra gruppe I (ab) og III (a); blod fra 2. gruppe - A (II);

    3) agglutinering skjedde med sera fra gruppe I (ab) og II (b); blod fra den tredje gruppen - B (III);

    4) agglutinering med alle tre sera; i dette tilfellet er det nødvendig med en tilleggsstudie med standard AB (IV) gruppe sera; bare fraværet av agglutinasjon i denne dråpen lar oss vurdere at dette er den fjerde blodgruppen - AB (IV).

    Bestemmelse av Rh-faktoren ved ekspressmetoden (på et plan uten oppvarming)

    På en plate med en fuktbar overflate eller plate, er “anti-Rhesus serum” og “kontrollserum” indikert. Under inskripsjonene påføres 1-2 dråper passende reagenser. Testblod tilsettes begge dråper. For dette formålet kan du bruke blod hentet fra fingeren eller røde blodlegemer fra bunnen av røret etter dannelsen av en koagulering. Hvis blod tas fra en finger, tilsettes det i en mengde som tilsvarer volumet av serum. Når du bruker en suspensjon av røde blodlegemer, er den nødvendige mengden lik halve volumet av serum.

    Blod blandes med serum med en tørr glassstav og en agglutineringsreaksjon forventes i 5 minutter. For å oppdage falsk agglutinering etter 3-4 minutter tilsettes 5-6 dråper isoton natriumkloridoppløsning til hver dråpe..

    Bestemmelsesresultater. Tilstedeværelsen av røde blodlegemeragglutinasjon i en dråpe med serum anti-Rhesus indikerer Rh-positiv blodtilknytning (Rh +). Fraværet av agglutinasjon indikerer Rh-negativ blodtilknytning (Rh-). Det skal ikke være noen agglutinasjon i kontrollserumet. Hvis det dukket opp, er dette serumet verdiløst.

    ABO-system.

    Blodgrupper bestemmes ved standard sera (enkel reaksjon), standard røde blodlegemer (dobbel eller kryssreaksjon) og ved bruk av sykloner.

    Standard isohemagglutinerende serum. For å bestemme gruppetilhørighet av blod hos mennesker brukes tre standard serum 0 (I), A (II), B (III), og sjeldnere AB (IV) -grupper. De er hovedsakelig tilberedt av blod, sjelden fra andre væsker (ascitic, pleural exudate). Oftest tas blod fra givere, cadaverisk eller retroplacentalt blod kan brukes. Etter blodsetting tas serum, som et konserveringsmiddel tilsettes - borsyre med en hastighet på 3,0 pulver per 100 ml serum, men det er bedre å tilsette det litt mer. Standard isohemagglutinerende serum må tilfredsstille følgende krav:

    1. Innen 15 - 20 sek. agglutinasjon med passende røde blodlegemer skal vises, og etter 2 minutter skal agglutinering være klar.

    2. Ikke gi agglutinasjon med røde blodlegemer fra nullgruppen og med samme navn.

    3. Ha en bildetekst på minst 1:32.

    4. Serum skal være klart, uten bevis for bakteriell forurensning..

    5. Hver ampulle skal ha et pass med betegnelse på gruppen, utløpsdato, titer, sted og tidspunkt for forberedelse, den tilsvarende fargen på stripen (en, to, tre, fire).

    For å forhindre mulige feil i bestemmelse av blodgrupper er standard isohemagglutinerende serum farget:

    Gruppene A (II) - i blått, B (III) - i rosa, AB (IV) - blå, 0 (I) - er ikke beiset, serum lagres ved en temperatur på +8 - 9º tett lukket. Bruk aktive standardsera av tre grupper (0, A, B) med en titer på minst 1:32, to serier.

    Metodikk for bestemmelse av blodgruppen: blodgruppen bestemmes ved en temperatur på +15 til + 20ºС. på tallerkener eller tabletter. På venstre side av tabletten er blodgrupper merket med alfabetisk transkripsjon. Midt på den øvre kanten av nettbrettet, blir etternavnet til giveren (mottakeren) notert. Bruk standard serum fra to serier med tre grupper (O, A, B) med en titer på ikke mindre enn 1:32. Én eller to dråper standard serum påføres en tallerken eller tablett i to rader, fra den første gruppen fra venstre til høyre. Dråper blod pipetteres rundt hver dråpe serum og blandes med vinkelen på en glassglide. Mengden blod skal være 8-10 ganger mindre enn serum. Deretter vippes tabletten forsiktig i hendene, noe som bidrar til en rask og tydelig agglutinasjon. Agglutinasjon begynner etter 3 minutter. Når agglutinering oppstår, tilsettes en dråpe saltvann og fortsetter å observeres til det har gått 5 minutter. Resultatet leses i overført dagslys, hvis agglutinasjonen ikke er klar, tilsettes en dråpe av en isotonisk natriumkloridoppløsning til blandingen, hvoretter de gir en endelig konklusjon om gruppetilhørigheten..

    1. Fraværet av agglutinering i alle tre dråper indikerer at det ikke er noen agglutinogener i testblodet, det vil si at blodet tilhører gruppe 0 (I).

    2. Begynnelsen av agglutinasjon i dråper med serum 0 (I) og B (III) indikerer at testblodet inneholder agglutinogen A, det vil si at blodet tilhører gruppe A (II).

    3. Tilstedeværelsen av agglutinasjon i dråper med serumgruppe 0 (I) og A (II) indikerer at testblodet inneholder agglutinogen B, det vil si blod fra gruppe B (III).

    4. Agglutinering i alle dråper indikerer tilstedeværelsen av agglutinogener A og B i testblodet, det vil si at blod tilhører gruppe AB (IV). Imidlertid, i dette tilfellet, gitt at agglutinering med alle sera er mulig på grunn av en ikke-spesifikk reaksjon, er det nødvendig å påføre to eller tre dråper standard serum av gruppe AB (IV) på en tablett eller plate og tilsette en dråpe testblod til dem. Serum og blod blandes, og resultatet av reaksjonen blir observert i 5 minutter. Hvis agglutinasjon ikke har skjedd, blir testblodet henvist til gruppe AB (IV). Hvis det vises agglutinering med serum fra gruppe AB (IV), er reaksjonen uspesifikk.

    Bestemmelse av blodtype ved dobbel reaksjon (ved standard sera og standard røde blodlegemer).

    Denne teknikken lar deg bestemme tilstedeværelsen av agglutinogener A og B i blodet, agglutininer a og β, dvs. bestemme den komplette blodformelen

    Bestemmelse av blodgruppering ved bruk av anti-A og anti-B sykloner. Anti-A og anti-B sykloner er produktet av hybridomcellelinjer. Dette er monoklonale anti-A- og anti-B-antistoffer, som er produsert av to forskjellige hybridomer. Anti-A og anti-B sykloniske kloner er fortynnet ascitesvæske av mus som inneholder spesifikke immunoglobuliner av klasse (I, G, M) rettet mot gruppespesifikke humane A- eller B-antigener.

    Feil i bestemmelse av gruppen av blod.

    Kan avhenge av tre grunner:

    Mindreverdighet av standard sera og standard røde blodlegemer;

    · Biologiske egenskaper ved testblodet.

    Feil på grunn av tekniske årsaker:

    · Feil plassering av sera på nettbrettet. I stedet for den påførte sera fra gruppe (B) til høyre, blir de påført til venstre;

    · Feil kvantitativt forhold mellom serum og røde blodlegemer;

    · Bruk av utilstrekkelig rene tabletter og andre gjenstander i kontakt med blod;

    · For hvert serum skal det være en egen pipette. For vasking av pipettene skal bare fysiologisk natriumkloridoppløsning brukes;

    · Feil registrering av testblodet;

    Manglende overholdelse av tiden som er satt for agglutineringsreaksjonen.

    I hastverk, når reaksjonen tas i betraktning før det har gått 5 minutter, kan det hende at agglutinasjon ikke forekommer hvis det er svake agglutinogener i testblodet. Hvis reaksjonen er overeksponert i mer enn 5 minutter, kan tørking av dråpene fra kantene forekomme, og simulere agglutinering, noe som også vil føre til en feilaktig konklusjon.

    Feil som er avhengig av bruken av mangelfulle standardsera og røde blodlegemer:

    Svak standard serum med en titer under 1:32 eller en utløpt holdbarhet kan føre til sen og svak agglutinasjon;

    · Bruk av ubrukelig standard sera og røde blodlegemer, et brudd på steriliteten.

    Feil fra blodets biologiske egenskaper:

    Tilstedeværelsen av svake agglutinogener i blodet

    · Blod har egenskapen panagglutinering eller autoagglutinasjon, det vil si at det gir uspesifikk agglutinering med alle serum og til og med med sitt eget.

    Rhesus faktor (Rh faktor).

    Rhesus-faktor ble først beskrevet i 1940 av K. Landsteiner og A. Wiener som en ny immunologisk egenskap av blod iboende hos folk flest.

    Rhesus-faktor er på de røde blodlegemene til mennesker, uavhengig av alder og kjønn og er ikke assosiert med ABO-systemet. Å være på erytrocytter hos mennesker sammen med agglutinogener A og B, har rhesus agglutinogen ikke de tilsvarende antistoffene i serumet - anti-Rhesus antistoffer som α eller β, men antistoffer kan utvikle seg hos mennesker med Rh-negativt blod under påvirkning av Rh - antigen som systematisk blir introdusert i kroppen til slike individer..

    Dette kan være underlagt: transfusjon til en person Rhesus - negativ, Rhesus - positivt blod. Når en gravid Rh - negativ kvinne utvikler Rhesus - et positivt foster.

    Rhesus-faktor er et sterkt, termisk antigen, siden når Rhesus-negative individer blir introdusert i kroppen, kan det føre til produksjon av spesifikke Rh-antistoffer. Den optimale temperaturen for å bestemme Rh - agglutinogen i røde blodlegemer er 45 - 48 ºC (i petriskåler).

    Bestemmelse av Rhesus-faktor og Rhesus-antistoffer.

    Bestemmelse av Rhesus - donorblodtilbehør utføres i to trinn:

    1. Bruken av en standard universell reagensantirhesus Rhο (D). 2. Deretter med standard universelt anti-Rh’o-reagens (DC), så vel som med standard anti-Rh’ ’’ o (DCE) serum. Hvis testblodet ga en positiv reaksjon (agglutinasjon) med et av disse reagensene, blir det ansett som Rhesus - positivt.

    DefinisjonsteknikkBruk en dråpe standard reagens og en dråpe testblod (eller røde blodlegemer) på bunnen av røret. Bland innholdet, rist og vipp røret sakte horisontalt slik at innholdet sprer seg over veggen på røret. For å utelukke uspesifikk aggregering av røde blodlegemer, skal 2-3 ml av en 0,9% NaCI-løsning tilsettes til reagensglasset og blandes uten risting med 2-3 ganger inversjon. Tilstedeværelsen av agglutinering i form av store flak av røde blodlegemer mot en bakgrunn av avklart væske indikerer Rhesus - en positiv Rh + blodreaksjon. Fraværet av agglutinasjon (homogen farget væske) indikerer en negativ blodreaksjon (Rh-).

    Dato lagt til: 2015-08-14; visninger: 1180; BESTILL SKRIFT AV ARBEID

    Bestemmelse av blodgruppe i henhold til ABO-systemet - et trekk ved teknikken

    Bestemmelse av blodgruppe i ABO-systemet

    For å forhindre komplikasjoner under blodoverføring på grunn av agglutineringsreaksjon, er det nødvendig å først bestemme den menneskelige blodgruppen.

    Formål med arbeidet: å bestemme blodgrupper i ABO-systemet (ved bruk av sykloner).

    Utstyr: kolikloner, sterilt skarphet, to glassstenger, standard serum fra gruppe I, II, III; hvit flis, bomullsull, alkohol, jod, eter. Studieobjekt - mann.

    Å utføre arbeid. Blodgrupper bestemmes av egenskapene til røde blodlegemer, som er etablert ved bruk av standard sera som inneholder kjente agglutininer (antistoffer).

    Påfør flisen, uten å blande, en dråpe standard sera fra gruppe I, II og III, som inneholder følgende agglutininer, henholdsvis: I-α og β, II-β og III - α. Etter å ha mottatt en dråpe blod fra en finger, overført en liten mengde av den til en dråpe serum fra gruppe I med den første glassstangen, overføres den andre rene enden av den samme stangen den samme mengden blod til serum fra gruppe II. Ved hjelp av en andre glassstang overføres en tredje dråpe testblod til serum i gruppe III. Hver gang blandes blodet grundig i en dråpe serum til blandingen blir jevn rosa. Agglutinasjonsreaksjonen skjer på 1-5 minutter. I nærvær av agglutinasjon mister dråpen homogenitet og blir gjennomsiktig, og røde blodlegemer klistrer seg sammen i form av klumper. Blodgruppen bestemmes avhengig av tilstedeværelse eller fravær av agglutinasjon.

    1. Hvis det ikke er agglutinering i alle tre dråper, indikerer dette fraværet av agglutinogener i de røde blodlegemene i testblodet, og det tilhører derfor gruppen I (0).

    2. Hvis agglutinasjon skjedde med sera fra gruppe I og III som inneholder henholdsvis agglutininer α + β og α, inneholder de røde blodlegemene i testblodet agglutinogen A og dette blodet tilhører gruppe II (A).

    3. Hvis agglutinering skjedde med sera fra gruppe I og II som inneholder agglutininer α + β og β, inneholder de røde blodcellene i testblodet agglutinogen B og det tilhører gruppe III (B).

    4. Hvis agglutinering skjedde med sera fra gruppe I, II og III, som inneholder henholdsvis α + β, β og α agglutininer, inneholder de røde blodlegemene i testblodet både agglutinogen A og agglutinogen B. Derfor hører testblodet til gruppe IV (AB).

    Nylig blir bestemmelsen av humane blodgrupper i ABO-systemet utført ved bruk av anti-A og Anti-B sykloner (monoklonale antistoffer Anti-A og Anti-B), som brukes enten i utveksling eller parallelt med polyklonale immunsera. Monoklonale anti-A- og Anti-B-antistoffer er produsert av to murine hybridomer og tilhører immunoglobuliner av klasse M. Sykloner er laget av ascitic væske av anti-A og anti-B hybridom mus. Reagensproduksjonsteknologi eliminerer muligheten for kontaminering med humane sykdomsfremkallende virus.

    Tabell 1. Evaluering av resultatene for bestemmelse av blodgrupper ved bruk av sykloner

    Resultatene av reaksjonen med tsiklonomBlodtype
    Anti-enAnti-in
    --0 (1)
    +-A (II)
    -+I (III)
    ++AB (IV)

    Å utføre arbeid. Pip Anti-A og Anti-B syklonkloner med individuelle pipetter i en stor dråpe. Ved siden av dråper antistoffer, bruk en liten dråpe testblod. Se reaksjonens forløp med syklonene visuelt med en sving av platen i 3 minutter. Agglutinering av røde blodlegemer med tsiklonom forekommer vanligvis i løpet av de første 3-5 sekundene, men observasjon bør utføres i 3 minutter på grunn av det sene utseendet på røde blodlegemeragglutinasjoner som inneholder svake varianter av antigener A eller B. Et positivt resultat kommer til uttrykk i røde blodlegemer. Hvis reaksjonen er negativ, forblir dråpen jevn farget rød.

    Plustegnet (+) indikerer tilstedeværelsen av agglutinasjon, minustegnet (-) indikerer fraværet av agglutinasjon.

    Registrering av protokollen. Registrer hvilken blodgruppe blodet ditt tilhører. Bestem: hvilke blodgrupper som kan transfuse blodet ditt, og hvilke blodgrupper du kan transfuse?

    Situasjonsoppgaver for å bestemme det endelige kunnskapsnivået til studentene:

    Med langvarig sult utvikler mennesker det såkalte sultne ødem. Hva er grunnen?

    Mannen spiste mat av dårlig kvalitet. Etter en tid har han økt blodviskositet. Hvordan kan dette forklares?

    En blodprøve avdekket at 80% av hemoglobin er fosterhemoglobin. Hvem eier blodet?

    Når man teller Goryaevs celler i store firkanter, ble 580 røde blodceller funnet. Hvor mange av dem er inneholdt i 1 ml blod, hvis blodet i melangen var samlet opp til markeringen 0,5?

    I 25 store firkanter av Goryaevs celle var det 100 leukocytter. Hvor mange av dem er inneholdt i 1 mm 3 blod, hvis det ble skrevet inn i melangen til merket 0,5?

    1 ml 3 blod inneholder 6 mln. røde blodceller. Hvor mange av dem er i det sirkulerende blodet hvis 20% av alt blodet er i bloddepotet? Kroppsvekt tatt som 80 kg.

    Som et resultat av transfusjon av en inkompatibel blodgruppe vil røde blodlegemer feste seg, noe som senere vil føre til hemolyse. Hvilken type hemolyse?

    Hvorfor er kvinner forbudt å jobbe i produksjon med høyt vibrasjonsnivå, kjøre tunge kjøretøy, etc..?

    Hva er årsaken til økningen i bilirubin i blodet under eddiksyreforgiftning?

    Faderens blod er Rh-positivt, moren er Rh-negativ, det første svangerskapet. Er det fare for Rhesuskonflikt mellom mor og foster hvis fosteret har Rh-positivt blod?

    Faren har Rh-negativt blod, moren har Rh-positiv. Fosteret har ikke en Rhesus-faktor. Er det fare for Rhesuskonflikt mellom fosteret og moren?

    Hvorfor kan akutt hjerteinfarkt oppstå under akutt psykisk stress??

    Blodkoagulasjon er en kompleks enzymatisk "kaskade" multikomponentprosess. Det normale løpet av hver forrige fase sikrer utvikling og fullføring av hver påfølgende fase. Hva skjer i den første, andre og tredje fasen av koagulasjonshemostase? Hva inkluderer hemokoagulering etter fase?

    For det normale løpet av blodkoagulasjon er det nødvendig med en rekke faktorer: protrombin, tromboplastin, AS - globulin, ionisert kalsium, proconvertin, etc. Hva er den faktoren hvis deltagelse er nødvendig i løpet av alle faser av hemokoagulering. Hvilken faktor gir omdannelsen av løselig fibrin - polymer til uoppløselig fibrin? Hvor dannes protrombin? Hvilke faktorer er involvert i dannelsen av plasma og vev protrombinaser?

    Fant du ikke det du lette etter? Bruk søket:

    Beste ordtak: En student er en person som hele tiden setter av uunngåelighet. 10718 - | 7360 - eller les alt.

    188.163.64.82 © studopedia.ru Han er ikke forfatteren av materialene som er lagt ut. Men gir mulighet for gratis bruk. Er det brudd på copyright? Skriv til oss | Tilbakemelding.

    Deaktiver adBlock!
    og oppdater siden (F5)
    veldig nødvendig

    Metoder for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet.

    Blodgruppen i henhold til ABO-systemet bestemmes av tilstedeværelsen av to antigener i røde blodceller, betegnet med de latinske bokstavene A og B. Antigen A er bundet av agglutinin α, antigen B er bundet av agglutinin β. I humant blod kan agglutinogener og agglutininer som reagerer med hverandre (“med samme navn”) ikke være til stede (ellers vil røde blodlegemer agglutinere). Dermed har blodet fra 4 grupper følgende sammensetning:

    Gruppenr. Og betegnelseRøde blodlegemer agglutinogenerAgglutininer av plasma
    Jeg (O)Neiα og β
    II (A)OGβ
    III (B)α
    IV (AB)A og bNei

    For å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet, brukes standard sera oppnådd fra giverblod fra 4 grupper og som inneholder agglutininer a og ß i forskjellige kombinasjoner. En dråpe standard serum fra hver gruppe, som forhindrer blanding av dem, blir lagt på en hvit keramisk plate. Ved å bruke de 4 hjørnene av en glassglide, blir en liten mengde testblod introdusert i hver dråpe serum (blod / serumvolumforhold = 1 / 5-1 / 10). Blod og serum blandes i 5 minutter ved å svinge platen jevnt. I fravær av agglutinering forblir dråpen jevn og ensfarget. Under agglutinasjon dannes en gjennomsiktig dråpe med korn av agglutinerte røde blodlegemer. Blodgruppen bestemmes av serumet der agglutinasjonen skjedde:

    Tabellen viser at for å bestemme blodgruppen, i prinsippet, er tilstrekkelig seraene fra gruppene II (β) og III (α), som henholdsvis oppdager tilstedeværelsen av antigenene B og A i de røde blodlegemene i testblodet. Et komplett sett med serum brukes til å kontrollere.

    Eksempel. Ved bestemmelse av blodgruppen ble agglutinering bare observert i sera fra II (A) og III (B) -gruppene, men ikke i serum fra I (O) -gruppen. Dette skal ikke være, noe som indikerer en teknisk feil i bestemmelsen av blodtypen. I dette tilfellet gjentas studien ved å bruke nye sera..

    Bestemmelse av Rhesus-faktor i menneskets blod.

    Det er flere metoder for å bestemme Rh-faktoren:

    1. Metoden for conglutination på Petri-retter. For denne studien, i tillegg til øyepipetter og en flaske med en isoton natriumkloridoppløsning, er det nødvendig å ha petriskåler, et vannbad med en konstant temperatur på 46-48 0 С og standard anti-rhesus serum fra alle grupper av ABO-systemet. For analyse tas to serier av anti-Rhesus serum, en gruppe i henhold til ABO-systemet med de undersøkte røde blodlegemene:

    · 2 dråper anti-Rhesus serum blir brukt på petriskålen, til venstre - den ene serien, til høyre - den andre i 3 rader for 3 studier;

    · Tilsett en dråpe røde blodlegemer i hver serie (test, kontroll Rh-positiv og kontroll Rh-negativ);

    · Etter blanding plasseres petriskålen i vannbad i 10 minutter, hvoretter den undersøkes i overført lys. Tilstedeværelsen av agglutinasjon indikerer et positivt resultat, fraværet indikerer et negativt resultat. For kontroll i denne metoden brukes åpenbart Rh-negative og Rh-positive røde blodlegemer..

    2. Bestemmelse av Rhesus-tilknytning etter in vitro-metode uten oppvarming. For denne metoden brukes et standard universelt reagens, som er anti-D serum med ufullstendige antistoffer, med tilsetning av 33% polyglucin som et kolloidalt medium:

    · I et tørt reagensglass tilsett en dråpe av de undersøkte røde blodlegemene og en dråpe av det universelle antirhesus-reagenset;

    · Innholdet blandes ved sakte å vri røret slik at det sprer seg over veggene.

    · Etter 3 minutter, tilsett 2-3 ml av en isoton NaCl-løsning til reagensglasset og bland innholdet med 2-3 ganger inversjon av prøverøret uten å riste;

    · Røret blir sett i lyset. Resultatet bestemmes av tilstedeværelsen eller fraværet av agglutinasjon. Hvis det på bakgrunn av en klar saltoppløsning er agglutinater i form av klumper eller flak fra limte røde blodlegemer, anses testblodet som Rh-positivt. I fravær av agglutinering, jevn farging av løsningen, anses testblodet som Rh-negativ.

    3. Bestemmelse av Rhesus-tilknytning ved metoden for agglutineringsreaksjon på et plan ved bruk av sykloner (syklon er en saltoppløsning av monoklonale antistoffer mot antigener lokalisert på overflaten av menneskelige røde blodceller) anti-D super. For å gjøre dette, bruk et spesielt reagens som inneholder monoklonale antistoffer mot Rh-faktoren (anti-D supercoliclon eller lignende):

    · En stor dråpe (ca. 0,1 ml) av reagenset blir påført platen eller tabletten, og en liten dråpe (0,02-0,03 ml) av de undersøkte røde blodlegemene er i nærheten;

    · Bland reagenset grundig med røde blodlegemer med en glassstav;

    · Etter 10-20 sekunder, vipp platen forsiktig. Til tross for at en klar agglutinering skjer nærmest øyeblikkelig, blir reaksjonsresultatene tatt i betraktning 3 minutter etter blanding. I nærvær av agglutinering er testblodet markert som Rh-positivt, i fravær - som Rh-negativ.

    Dato lagt til: 2018-08-06; visninger: 369; BESTILLER JOBB

    Plasmaantigener

    Plasma (serum) antigener er visse komplekser av aminosyrer eller karbohydrater på overflaten av blodplasma (serum) proteinmolekyler..

    BLODGRUPPENS KONSEPT

    BLODGRUPPE - en kombinasjon av normale immunologiske og genetiske tegn på blod, som er arvelig bestemt og er en biologisk egenskap for hver enkelt.

    Blodgrupper arves, dannes ved 3-4 måneders fosterutvikling og forblir uendret hele livet. Det antas at hos blodgruppen inkluderer flere dusin antigener i forskjellige kombinasjoner. Disse kombinasjonene - blodgrupper - kan faktisk være flere milliarder. I praksis er de bare identiske i identiske tvillinger med samme genotype..

    I praktisk medisin gjenspeiler begrepet "blodgruppe" som regel kombinasjonen av erytrocyttantigener i ABO-systemet og Rh-faktoren og de tilsvarende antistoffene i blodserumet..

    For hvert kjente antigen ble det funnet antistoffer med samme navn (anti-A, anti-B, anti-Rhesus, anti-Kell, etc.). Blodgruppeantistoffer er ikke en så konstant egenskap til menneskekroppen som antigener. Bare i ABO-gruppesystemet er antistoffer en normal medfødt egenskap av blodplasma. Disse antistoffene (agglutininer a og b) er konstant til stede i humant plasma.

    Avo bestemmelse av blodtype

    1. Blodgrupper i henhold til avo-systemet

    Begrepet "kompatibilitet" forstås som en kombinasjon av blod fra en giver og en mottaker for antigener og antistoffer, som ikke forårsaker immunologiske interaksjoner.

    Avhengig av tilstedeværelsen av agglutinogener A og B i røde blodlegemer, og i serumet til de tilsvarende agglutininene a og b, er alle mennesker delt inn i fire grupper:

    • Gruppe O (I) - det er ingen agglutinogener i røde blodlegemer, agglutininer a og b i serum.

    • Gruppe A (II) - agglutinogen A i røde blodlegemer, agglutinin b i serum.

    • Gruppe B (III) - agglutinogen B i røde blodlegemer, agglutinin a i serum.

    • Gruppe AB (IV) - agglutinogener A og B i røde blodlegemer, ingen agglutininer i serum.

    Antigen A er ikke homogen, det er to hovedtypetyper av det: I følge dette har gruppe A (II) to undergrupper A (P) og A2 (II), og gruppe AB (IV) - AB (IV) og A2I (iv).

    Gruppeantigen B er mer ensartet, selv om det er beskrevet sjeldne varianter. Dette har imidlertid ikke vesentlig klinisk betydning.

    Metoden for å bestemme blodgrupper

    Gruppeblodtilhørighet i henhold til ABO-systemet bestemmes ved bruk av agglutineringsreaksjonen. For tiden er det tre metoder for å bestemme blodgrupper i henhold til ABO-systemet:

    • for standard isohemagglutinerende serum,

    • for standard isohemagglutinerende sera og standard røde blodlegemer (tverrsnittsmetode),

    • bruk av monoklonale antistoffer (sykloner anti-A og aichi-B).

    I en rutinemessig studie bestemmer sykehuslegen blodgruppen ved å bruke standard isohemagglutinerende sera eller ved hjelp av sykloner, hvoretter den sender blod til serologilaboratoriet for å sjekke gruppen med en tverrsnittsmetode..

    En blodgruppe anses som definert bare når laboratoriet bekreftet dataene innhentet av sykehuslegen. Hvis resultatene fra studiene er forskjellige, må begge studiene gjentas..

    I en nødsituasjon (når blødning krever en akutt blodoverføring) bestemmer sykehuslegen selve gruppen (på laboratoriet blir en sjekk gjort, men etter faktum).

    BESTEMMELSE AV BLODGRUPPER AV STANDARD ISOGEMAGLUTINISERING SERUM

    Hyppigst i klinisk praksis og laboratoriepraksis.

    Essensen av metoden er å påvise gruppeantigener A og B i testblodet ved å bruke standard isohemagglutinerende sera. Gjennomført i et rom med god belysning ved en temperatur på 15-25 ° C.

    a) Nødvendig utstyr

    • Standard isohemagglutinerende serum fra grupper O (I), A (II), B (III) og AB (IV) i to forskjellige serier. Serum skal være gjennomsiktig, uten tegn til forfall. For enkelhets skyld farges standard hemagglutinerende serum fra forskjellige grupper i en viss farge: O (I) - fargeløs (grå), A (II) - blå, B (III) - rød, AB (IV) - lys gul. Det skal bemerkes at disse fargene følger med alle etiketter på blodprodukter som har tilknytning til en gruppe (blod, erytrocyttmasse, plasma osv.).

    • Hvite plater av porselen eller emalje eller andre plater med fuktbar overflate, merket 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

    • Isotonisk natriumkloridløsning.

    • Nåler, pipetter, glasspinner (glassglider).

    b) Reaksjonsteknikk

    1. Påfør en isohemagglutinerende serum I, II, III-gruppe på en plate (plate) i et volum på 0,1 ml (en stor dråpe ca. 1 cm i diameter). For å unngå feil, blir det brukt to serier med sera fra hver gruppe. Totalt 6 dråper.

    2. Seks dråper testblod omtrent på størrelse med et tappehode på 0,01 ml (liten dråpe) overføres sekvensielt med en tørr glassstang til en plate med 6 punkter, hver ved siden av en dråpe standard serum (mengden testblod skal være omtrent 10 ganger mindre enn mengden standard serum ), så blir de forsiktig blandet ved hjelp av glassstenger med avrundede kanter.

    3. Rist med jevne mellomrom etter at du har blandet.

    Agglutinasjonen begynner i løpet av de første 10-30 sekundene.

    4. I de dråpene hvor agglutinering skjedde, tilsett en dråpe av en isotonisk natriumkloridløsning, hvoretter reaksjonsresultatet blir evaluert.

    Med en positiv reaksjon, vanligvis i løpet av de første 10-30 sekundene, vises små røde korn (agglutinater) bestående av limte røde blodceller synlige med det blotte øye i blandingen.

    Hvis seraene fra alle tre gruppene ga en positiv reaksjon, indikerer dette at testblodet inneholder både agglutinogener - A og B og tilhører gruppe AB (IV). I slike tilfeller, for å utelukke en ikke-spesifikk agglutineringsreaksjon (kald agglutinasjon, pangglutinasjon, allergi), er det imidlertid nødvendig å gjennomføre en ytterligere kontrollundersøkelse av testblodet med standard isohemagglutinerende serum fra gruppe AB (IV) som ikke inneholder agglutininer. Bare fraværet av agglutinering i denne dråpen i nærvær av agglutinasjon i dråper som inneholder standard serum fra gruppene 0 (1), A (II) og B (III) gjør det mulig for oss å betrakte reaksjonen som spesifikk og tilordne testblodet til gruppe AB0 (IV).

    Det skal bemerkes at i nærvær av et svakt antigen A-undertype i testblodet begynner agglutineringsreaksjonen med hemagglutinerende serum fra gruppe 0 (1) og B (III) senere (3-4 minutter). For å bestemme antigen A-undertypen nøyaktig, er en tilleggsreaksjon med det såkalte anti-A-reagenset nødvendig.

    BESTEMMELSE AV BLODGRUPPER VED STANDARD ISOGHEMAGLUTINISERING SERUM OG STANDARD ERYTROCYTTER (KROSSMETOD)

    Metoden brukes ofte i serologiske laboratorier. Essensen av metoden er å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet i testblodet fra gruppe A-antigener A og B ved bruk av standard iso-hemagglutinerende sera, så vel som gruppeantistoffer a og b ved bruk av standard røde blodceller.

    • Utstyr for reaksjon med standard røde blodlegemer er forskjellig i at det for agglutineringsreaksjonen er standard røde blodlegemer fra tre blodgrupper: 0 (1), A (II), B (III).

    • Standard røde blodlegemer tilberedes fra blodet fra givere med en tidligere kjent blodgruppe, lagret ved 4-8 ° C.

    En stor dråpe av testblodserumet fra reagensglasset (0,1 ml) blir påført en markert plate med en pipette i seks celler, og ved siden av dem er en liten dråpe (0,01 ml) standard røde blodlegemer fra gruppe 0 (1), A (P), H (W) (to serier hver).

    Et trekk ved tolkningen av reaksjonsresultatene med standard erytrocytter er at erytrocytter fra gruppe 0 (1) er kontroll (det er ingen antigener i dem, noe som gjør det umulig i prinsippet en spesifikk agglutineringsreaksjon med noe serum).

    BESTEMMELSE AV BLODGRUPPER AV MONOKLONALE ANTIBODIER

    Monoklonale antistoffer brukes til å bestemme blodgruppen, som hybridombioteknologi brukes til..

    Et hybridom er en cellehybrid dannet ved fusjon av en benmargssvulstcelle (myelom) med en immunlymfocytt som syntetiserer spesifikke monoklonale antistoffer. Hybridomet får egenskapene til begge "foreldre": evnen til ubegrenset vekst som er karakteristisk for en tumorcelle, og evnen til å syntetisere antistoffer som ligger i en immunlymfocytt.

    Standardreagenser - monoklonale antistoffer (MAB) er utviklet: anti-A og anti-B kolikloner, som brukes til å bestemme erytrocyttagglutinogener. Tsoliklon er lyofilisert pulver med rød (anti-A) eller blå (anti-B) farge, som fortynnes med isotonisk natriumkloridløsning rett før studien.

    Anti-A og anti-B sykloniske sykloner påføres en hvit tablett, en stor dråpe (0,1 ml) under de respektive merkelappene: anti-A eller anti-B. Ved siden av dråper antistoff påføres en liten dråpe (0,01 ml) av testblodet. Etter blanding av komponentene observeres agglutineringsreaksjonen i 2-3 minutter.

    I 1940 oppdaget K. Landsteiner og A. S. Wiener et helt nytt antigen i menneskelige erytrocytter, som de kalte Rh-faktoren (Rh). Rhesus-faktor er til stede i blodet til 85% av mennesker, og 15% av individene inneholder ikke denne faktoren. Så det heter, med navnet Macaque Rhesus, som han alltid har.

    Rhesus-antigener er klassifisert som lipoproteiner. De er veldig aktive og i stand til å forårsake dannelse av immunantistoffer..

    Tilstedeværelsen av et Rhesus-antigen påvises i et humant foster fra 5-8 uker og kommer godt til uttrykk i et 3-4 måneder gammelt embryo.

    ABO bestemmelse av blodtype

    Utstyr:

    To sett med standard serum 0 (I), A (II), B (III) grupper av to forskjellige serier og en ampulle med serum AB (IV).

    · Et sett med pipetter for hver gruppeflaske.

    · Flaske med isotonisk natriumkloridløsning med pipette.

    · Glassbilder eller glasspinner - 8 stk.

    · Still inn "Rhesus" eller panorering.

    · Timeglass i 3 minutter. og 5 min.

    · Blodtypebestemmelse utføres i et rom med god belysning og en temperatur fra 15 ° C til 25 ° C. Serum lagres i kjøleskap ved en temperatur på + 4 ° С til + 10 ° С.

    3.2 Teknikk for bestemmelse av blodgruppen:

    · Ta på en plate i den aktuelle sektoren et stort dråpe serum av to serier av I (O), II (A), III (B) grupper.

    · Tilsett deretter forberedt testblod i rekkefølge til serumdråpene ved hjelp av et hjørne av en glassglide eller en glassstang og bland grundig; en dråpe blod skal være 5-10 ganger mindre enn en dråpe serum.

    • Bland deretter blodet grundig med serum ved å riste platene.

    Foreløpige resultater evalueres etter 3 minutter, hvoretter en dråpe isotonisk natriumkloridløsning tilsettes, blandes igjen og etter 5 minutter.

    · Gjennomfør en sluttvurdering av agglutineringsreaksjonen (blanding av pasientens blod og standard sera).

    · Agglutineringsreaksjonen bestemmes av legen.

    · Resultatet av reaksjonen legges inn i henvisningsskjemaet eller merkes på forsiden av sykehistorien, der datoen for bestemmelse av blodgruppen og den personlige signaturen til legen og sykepleieren som bestemte blodgruppen er satt.

    · Deretter blir testblodet sendt til det kliniske laboratoriet for å bestemme blodgruppen på nytt (for å unngå feil) og Rh-faktoren.

    · Donorblodgruppen fra hetteglasset bestemmes av samme system og verifiseres med posten på dette hetteglasset.

    3.3 Evaluering av agglutineringsreaksjonen:

    · Positivt - flak og korn fra stikkende røde blodlegemer skiller seg ikke ut når du tilsetter isotonisk natriumkloridløsning og blander.

    · Negative - serumdråper på en tallerken er gjennomsiktige, jevn rosa i fargen, inneholder ikke flak og korn.

    Kombinasjoner av agglutineringsreaksjoner:

    · Alle tre serumene i begge seriene gir ikke agglutinasjonstestet blodgruppe 0 (I).

    Agglutineringsreaksjon negativ med serum A (II) grupper i begge serier og positiv med serum 0 (I) og B (II) - testblod fra gruppe A (II).

    Negativ agglutinasjonsreaksjon med serum B (III) -grupper i begge serier og positiv med serum 0 (I) og A (II) -grupper - testblod fra gruppe B (III).

    · Serum 0 (I), A (II), B (III) -grupper gir en positiv reaksjon i begge serier. Blod tilhører AB (IV) -gruppen. Før du avgir en slik konklusjon, er det nødvendig å utføre en reaksjon med standard serum AB (IV) -gruppe i henhold til samme prosedyre. Den endelige agglutineringsreaksjonen gjør at testblodet kan tilordnes AB (IV) -gruppen.

    3.4 De vanligste feilene ved bestemmelse av blodgruppen:

    · Svak aktivitet av standard serum.

    Overdreven mengde testblod tilsatt standard serum.

    · Langsom agglutineringsreaksjon ved høy omgivelsestemperatur.

    · Falske agglutinasjoner ved tørking av en dråpe serum og dannelse av "mynt" kolonner med røde blodlegemer eller manifestasjonen av kald agglutinasjon (omgivelsestemperatur under 15 ° C).

    · I alle tvilstilfeller må du studere gruppetilhørighet til standard serum i andre serier på nytt.

    · Legge til en dråpe isotonisk natriumkloridløsning i testblod og -serum, samt gjennomføre studier ved temperaturer over 15 ° C for å unngå disse feilene.

    · Gruppetilhørigheten til pasientens blod, uavhengig av tidligere definert tilknytning, bestemmes hver gang under transfusjon av blod og dets komponenter.

    · Merk gruppetilhørigheten på grunnlag av merket i passet, utdrag fra sykehistorien eller andre attester er IKKE TILLATT.

    3.5 Lagringsregler for gruppe standard sera:

    · Holdbarheten for gruppeseromer bestemmes på flaskens etikett og leveres av BRSPK NIIPK når de oppbevares i kjøleskapet (t + 4 ° С).

    · Fra åpningstidspunktet kan flaskene med gruppeserum brukes i 10 dager når de oppbevares i kjøleskapet (t + 4 °). Hvis det ser flak av serumgruppeflak og tilstedeværelsen av uklarhet, må serumet byttes ut.

    3.6 Test for gruppekompatibilitet:

    · Det utføres med pasientens serum.

    · Påfør 2-3 dråper av pasientens serum på den hvite platen.

    · Tilsett en dråpe donorblod 5 ganger mindre.

    · Bland blod, rist med jevne mellomrom i 5 minutter, mens du observerer resultatet av reaksjonen.

    Fraværet av agglutinering av donorarytrocytter indikerer kompatibiliteten til donor- og mottakerblod i forhold til ABO-blodgrupper.

    · Utseendet til agglutinering indikerer deres inkompatibilitet og avvisning av transfusjon av dette blodet.

    · Hvis pasienten mottar blod fra flere hetteglass, bør det utføres en kompatibilitetstest med blod fra hvert hetteglass, selv om blod er mottatt fra en giver.

    3.7 Test for individuell kompatibilitet (Rhesus-kompatibilitet):

    · 2 dråper av pasientens serum og en liten (0,1 ml) bloddråpe fra hetteglasset (giverblod) tilsettes petriskålen.

    · En petriskål plasseres i et vannbad - et sett "Rhesus" ved en vanntemperatur på 46-48 ° C i 10 minutter.

    · Hvis det ikke er noen agglutineringsreaksjon, er blodet individuelt kompatibelt, og du kan fortsette til en biologisk kompatibilitetstest.

    3.8 Biologisk prøve:

    · Det utføres ved intravenøs jetadministrasjon i tre trinn med et intervall på 3 minutter med blod, avhengig av alder fra 2 ml til 15 ml (som foreskrevet av legen). Transfusjonshastighet - 5 minutter. I prosessen blir pasientens tilstand observert.

    · Hvis det ikke er bevis på inkompatibilitet etter jetinjeksjon av blod (angst, kortpustethet, innsnevringsfølelse, smerter i korsryggen og magen, frysninger, økt hjertefrekvens og pust, redusert blodtrykk), blir en lignende test utført to ganger og deretter overført til slutten.

    · Utførelsen av alle disse prøvene blir utført under tilsyn av en lege.

    Overført blod, blodprodukter holdes ved romtemperatur i 30 - 40 minutter, og i nødstilfelle blir de oppvarmet til en temperatur på + 37 ° C i et vannbad under kontroll av et termometer. Transfusjon av blod og dets komponenter utføres under tilsyn av en lege. Blodet som blir igjen i hetteglasset - omtrent 20 ml, uten å krenke antiseptika, blir lagt i kjøleskapet, hvor det oppbevares ved en temperatur på + 4 ° i 48 timer. Hvis en pasient utvikler en reaksjon eller komplikasjoner, kan dette blodet brukes til å finne ut årsaken til deres forekomst (blodkultur, bestemmelse av tilknytning til gruppe eller Rhesus, sjekke prøven for kompatibilitet av transfusert blod med pasientens blod).

    3.9 Regler og betingelser for lagring av blod og dets preparater:

    · Alle blodprodukter oppbevares i kjøleskap ved en temperatur fra + 4 ° til + 6 ° C i en oppreist stilling.

    · Det bosatte blodet skal ha en klar lagdeling: det første (øvre) laget av gylden gul farge - blodplasma - skal være gjennomsiktig; det andre laget med gråaktig farge - homogen, tynn - et lag med hvite blodlegemer; det tredje laget med ensartet mørk rød farge - et lag med røde blodlegemer.

    · Det anbefales å bruke blod til transfusjon innen 10 dager fra høstingsdatoen; maksimal holdbarhet på 21 dager.

    · Etter utseendet på flak, koagulater, rosa flekker av plasma, samt etter utløpet av lagringsperioden, er ikke blodet egnet for transfusjon.

    Erytrocyttmasse lagres fra 7 til 23 dager, avhengig av konserveringsmiddelet.

    Leukocyttmasse lagres i 48 timer.

    · Tørt plasma lagres ved romtemperatur + 20 ° C i opptil 5 år.

    Nyfrosset plasma (FFP) lagres i fryseren i opptil 6 måneder.

    3.10 Registrering av blodoverføring og dets preparater:

    · Etter å ha fullført en blodoverføring, blir det laget en journal i en spesiell journal for transfusjonsregistrering som indikerer dosen av transfusert blod, passdataene, resultatene av kompatibilitetstester, tilstedeværelsen eller fraværet av komplikasjoner.

    · En blodoverføringsprotokoll blir limt inn i pasientens sykehistorie, der ovennevnte elementer for transfusert blod og dets komponenter er indikert, signert av legen som er ansvarlig for blodoverføring.

    3.11 Observasjon av pasienten etter blodoverføring:

    · Etter transfusjon av blod og dets komponenter, trenger pasienten sengeleie i 3-4 timer.

    · Overvåking av pasienten utføres på dagtid: vurdering av allmenntilstanden, oppførsel, klager, utseende, hudens tilstand, vannlating.

    · Tre timer i timen, pasienten termometeres, pulsen beregnes, blodtrykket måles.

    Dagen etter gjør de en generell blod- og urintest.

    · Hvis kroppstemperaturen ikke økte i løpet av 3 timer etter transfusjon med termisk termisk temperatur, kan vi anta at det ikke var noen reaksjon på blodoverføring.

    |neste foredrag ==>
    GRUNNLEGGENDE BESTEMMELSER FOR BESTEMMELSE AV BLODGrupper i ABO-systemet for overføring av blod og komponentene|Teknikk for kunstig lungeventilasjon

    Dato lagt til: 2013-12-14; Visninger: 902; Brudd på opphavsretten? ;

    Din mening er viktig for oss! Var det publiserte materialet nyttig? Ja | Nei

    Bestemmelse av blodgruppe i henhold til ABO-systemet - et trekk ved teknikken

    Metoden for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet

    For studien er standard hemagglutinerende serum I (O), II (A), III (B), IV (AB) nødvendig, og de tre første variantene av serum bør presenteres i to serier.
    Serumet må være egnet for bruk, for dette er det nødvendig å kontrollere at det er i samsvar med utløpsdatoen som er angitt på serumetiketten, visuelt bestemme tilstanden. Ikke bruk myse hvis det er overskyet, inneholder urenheter, flak, suspensjon, misfarget.
    Serum anses som egnet for bruk hvis det er gjennomsiktig, ampullen har en etikett som dens viktigste egenskaper er indikert (serie, utløpsdato, gruppetilhørighet, fargemerking i henhold til gruppetilhørighet), ampullen er ikke skadet, ikke åpnet.
    Det trengs en ren plate, som må deles inn i fire deler, og merke korrespondansen til hver spesifikk blodgruppe, en skarpe-nål, sterile bomullspinner, en ren, tørr, fettfri glassglide, alkohol. På en plate, i samsvar med merkingen, påføres en dråpe av hvert serum. Deretter behandles huden på putene til den venstre fingeren på venstre hånd med en steril bomullspinne med alkohol. Ved hjelp av en scarifier, stikker de huden og fjerner den første utstående bloddråpen (en blanding av alkohol og vevsvæske kan forvrenge resultatene av studien). Den neste dråpen blod tas med hjørnet av en glassglide, for hver dråpe serum - med et rent hjørne av glasset.
    For forskning tilsettes en dråpe blod i forholdet 10: 1 til en dråpe hemagglutinerende serum, og deretter, når du snur og rister platen forsiktig, blandes blodet. Agglutinering oppdages vanligvis i form av fallende flak, som er godt visualisert. For å klargjøre resultatet tilsettes en isotonisk natriumkloridoppløsning til dråpen, hvoretter resultatet blir evaluert med tilstrekkelig pålitelighet.
    En av forutsetningene for studien er samsvar med temperaturregimet.
    Hvis hemagglutinering skjer i en dråpe med sera I (O), III (B), men ikke forekommer med serum II
    (A), og resultatet tilsvarer sera fra to sera, dette betyr at testblodet tilhører gruppe III (B) i henhold til ABO-systemet.
    Hvis hemagglutinering skjer i en dråpe med sera I (O), II (A), men ikke forekommer med serum III
    (B), dette betyr at testblodet tilhører II (A) -gruppen i henhold til ABO-systemet.
    Men en situasjon er også mulig når hemagglutinasjon ikke forekommer med noen av de testede seraene, dessuten begge seriene. Dette betyr at testblodet ikke inneholder agglutinogener og tilhører I (O) -gruppen i henhold til ABO-systemet.
    Hvis agglutinering forekommer med alle sera fra begge serier, betyr dette at testserumet inneholder begge agglutinogener (A og B) og tilhører IV (AB) -gruppen i henhold til ABO-systemet.

    Hvordan bestemme en persons blodgruppe etter ABO-systemet, essensen av metoden og dens betydning

    Menneskelig blod er en unik væske som forener nesten hele dyreverdenen. Det er karakterisert og delt inn i grupper og Rh-faktor. Hvordan bestemmes blodgruppen av ABO-systemet? Hva er bestemmelsen av blodtypealgoritmen? Hvilket apparat som brukes til dette, og hva som kreves for denne prosedyren?

    Klassifiseringsfunksjoner

    For å forstå hvordan grupper er definert, er det viktig å forstå hva arven etter blodgrupper i henhold til ABO-systemet er, og hvordan blodtyper er forskjellige på molekylnivå..

    Type blodvæske påvirkes ikke av:

    Parametere av blodgrupper endres ikke over tid og forblir konstante gjennom hele livet..

    Mennesker med forskjellige blodtyper er kanskje ikke forskjellige.

    Blodgrupper er forskjellige i innholdet av forskjellige agglutinogener - elementer som ligger på røde blodlegemer og agglutininer som er til stede i plasma. Representanter for en gruppe har en type agglutinogen, mens den andre har andre. I noen blodtyper er det ingen slike komponenter i det hele tatt..

    Agglutinogener er av to typer:

    Tabellen nedenfor beskriver innholdet avhengig av gruppen:

    • den første gruppen - det er ingen agglutinogener;
    • den andre gruppen inneholder agglutinogener A;
    • den tredje gruppen er agglutinogener B;
    • fjerde gruppe - agglutinogener A og B samtidig.

    Ta hensyn til blodgruppen og Rh-faktoren er viktig under graviditet, spesielt når en kvinne er Rh-positiv og en mann er Rh-negativ. I dette tilfellet oppstår den immunologiske inkompatibiliteten til mor og foster, som et resultat av at sistnevnte blir avvist.

    Morens organisme reagerer på den som et fremmedartet fenomen. Som et resultat dør barnet, blir født for tidlig eller får en hemolytisk sykdom hos det nyfødte - en tilstand som krever en lang og kompleks behandling. Dette fenomenet oppstår hvis barnet har arvet en positiv Rh-faktor fra faren, og moren er Rh-negativ. I løpet av det første svangerskapet forekommer imidlertid ikke alltid isoimmunisering, siden antistoffer ikke har tid til å utvikle seg.

    En annen faktor som tar hensyn til de som samtykker til en blodoverføring. Noen ganger anbefales denne prosedyren for de som har fått kraftige blødninger, for eksempel når en stor arterie er skadet, et åpent brudd eller alvorlig tuberkulose..

    Å kjenne gruppen din og Rh er viktig for gravide

    En giver er en som donerer blod for transfusjon til en annen person. Den som tar dette biomaterialet kalles mottakeren. Blod med samme parametere anses som egnet for donasjon.

    Hvorfor du ikke kan ta feil av studien

    Det er ingen mekanisme for å kombinere forskjellige grupper. Når væsker i forskjellige kategorier blandes, skjer agglutinering, det vil si prosessen med å lime celler sammen. I nesten 100% av tilfellene er resultatet pasientens død. I prosessen med agglutinasjon samles blod i klumper i forskjellige størrelser. Sirkulasjon av en slik væske er dødelig..

    Personer med den første gruppen klarer ikke å ta annet blod enn det samme. Det er ingen agglutinogener i sammensetningen, så inntrengning av disse stoffene fører til beklagelige konsekvenser.

    Agglutinering forekommer ikke når noen form for blod går inn i fjerde kategori. Den inneholder agglutinogener av både A og B. En person med en fjerde blodgruppe regnes som en ideell mottaker.

    Hvorfor det er viktig å bestemme Rh-faktoren nøyaktig

    Det er imidlertid ikke bare å bestemme blodgruppen i henhold til AB0-systemet, men også å identifisere Rh-faktoren. Hva det er?

    Rhesus-faktor er et genetisk trekk uavhengig av mennesker. Type blod legges selv ved unnfangelsen, det er delt inn i Rh-positiv og Rh-negativ. Med utviklingen av Rhesus-konflikt produserer mors kropp antistoffer mot babyens biomateriale, og fosteret blir avvist.

    Du kan lære mer om hvordan blodvæsketyper og Rh-faktoren blir arvet ved å se videoen:

    Viktig! Hvis en Rhesus-konflikt oppstår under graviditet, kan det ende dødelig for babyen og forårsake komplikasjoner for kvinnens helse.

    Det har ikke noe å si om det er en graviditet i singleton eller monozygotiske tvillinger utvikler seg i en kvinne. Prosessen forårsaket av Rhesus-konflikten fører alltid til triste konsekvenser.

    Bestemmelsen av blodgruppen i henhold til ABO-systemet er viktig å gjennomføre i de tidlige stadiene av svangerskapet. En annen prosedyre er indikert for de som risikerte en blodoverføring..

    En Rh-inkompatibel blodoverføringsprosedyre resulterer i hemolyse. I kroppen begynner nedbrytningen av røde blodlegemer. I hovedsak er dette en immunrespons på inntrenging av fremmede celler i kroppen..

    Hemolysin frigjøres, det vil si et stoff som provoserer denne ødeleggelsen. Som et resultat utvikles alvorlig anemi. Hvis tilstanden er forårsaket av transfusjon, avsluttes ofte prosessen dødelig.

    Hemolyse - ødeleggelse av røde blodlegemer av antistoffer

    Definere grupper ved hjelp av sykloner

    Prinsippet for å bestemme blodgruppen med sykloner er en enkel prosedyre ved bruk av spesielle reagenser. Antigen- og agglutinin-prosessen er lys nok til å umiddelbart motta pålitelig, omfattende informasjon.

    Rekkefølgen på denne manipulasjonen er viktig. Bestemmelsen av blodgruppen i henhold til AB0-systemet utføres utelukkende på laboratoriet. For å opprettholde kvaliteten på reagensene og selve biomaterialet, er kjøling nødvendig, som ikke kan oppnås hjemme..

    Metodikken for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet ved hjelp av sykloner er et eksempel på en moderne diagnostisk metode og grunnlaget for fremtidig forskning og funn. Prosedyren kan utføres for kvinner som forventer baby, uavhengig av hvilken svangerskapsuke som pågår..

    Forberedelse til manipulasjon

    Hvordan arven etter blodgrupper i ABO-systemet oppstår, kan vi forstå om vi gjennomfører en detaljert studie av overføring av fysiologiske tegn. For at den oppnådde blodkarakteristikken skal være nøyaktig, må alle regler for dens oppførsel overholdes strengt. Vanligvis retter en genetiker slike manipulasjoner. Studien er en in vitro-analyse. Dekryptering er nødvendig, den utføres også av en lege.

    For at verken fysiologi, arvelighet eller stress påvirker resultatene av en laboratorietest, er det viktig å nøye overholde reglene for hvordan bestå en slik analyse og forholdene under hvilken den skal utføres..

    For å bestemme den naturlige genotypen riktig, er det viktig å observere følgende forhold:

    • på kontoret hvor operasjoner med reagenset utføres, bør det være en konstant temperatur i området fra 15-25 grader;
    • alle komponenter som brukes til å bestemme blodgruppesystemet, bør lagres i tett lukkede krukker;
    • for at standard forskningsmetode skal gi et klart resultat, bør laboratorieskapet være godt opplyst;
    • serum og andre komponenter som brukes i prosedyren, skal ikke inneholde klumper eller være overskyet.

    Vilkårene for prosedyren kan bare overholdes i en medisinsk institusjon. Det er påkrevd å utarbeide på forhånd verktøyene som vil være nødvendige for å bestemme typen i ABO-blodsystemet:

    • spesielle glassglass;
    • to typer sykloner;
    • to forskjellige pipetter;
    • glasspinner for blanding av reagenser;
    • en sprøyte for å manipulere pasientens blod;
    • bomullsull;
    • sterile våtservietter;
    • alkoholløsning;
    • sele for manipulasjon på venøse kar.

    Det er viktig å forberede seg godt til laboratorietester

    Etter at alt materiale og verktøy er forberedt for prosedyren, kan du fortsette med det.

    Fremgangsmåte

    En transfusjonspasient eller en gravid kvinne gir blod. For dette tas omtrent 5 ml biomateriale. Dette er normen for en pålitelig bestemmelse av gruppen.

    Etter dette blir en dråpe materiale og en dråpe av hvert reagens påført en tablett eller en spesiell plate. Det ene reagenset er i stand til å agglutinere med antigener inneholdt i den andre gruppen, og det andre er i stand til de i den tredje gruppen.

    Ved hjelp av en glassstang blandes en dråpe biomateriale med hvert reagens hver for seg. Reagenset som agglutinasjonen vil skje med, er determinanten av blodgruppen. Denne nyansen er av primær betydning..

    Slik multiple analyse dekrypteres som følger:

    • agglutinering av reagens A - den andre gruppen;
    • agglutinering av reagens B - den tredje gruppen;
    • agglutinering forekom ikke - den første gruppen;
    • agglutinering skjedde med begge reagenser - fjerde gruppe.

    En video om en slik studie på laboratoriet er beskrevet i videoen:

    Legenes oppmerksomhet vil tillate deg å bestemme gruppen og Rh-faktoren nøyaktig, noe som kan spille en avgjørende rolle i planleggingen og graviditeten. Så du kan redde et menneskes liv og trivsel, og gi noen par muligheten til å få barn.

    Metoder for å bestemme blodgrupper, tabellbeskrivelse

    Nesten hver person minst en gang i sitt liv besto en test for å etablere blodgruppen. Metodene for å utføre denne analysen og deres pålitelighet vil bli diskutert senere..

    Hva er diagnosen for??

    En blodgruppe er en viss serie antigener lokalisert på overflaten av røde blodlegemer, som bestemmer deres spesifisitet. Det er mange slike antigener, derfor er en enhetlig blodklassifisering av ABO og Rh-faktor tatt i bruk.

    Denne indikatoren er obligatorisk for pasienter før operasjon, militæret, politiet og andre kategorier av mennesker som kan trenge en øyeblikkelig blodoverføring.

    Standard testmetode for blodtype

    Den vanligste metoden for denne indikatoren er en metode som bruker standard serum. Denne diagnosen bestemmer vanlige antigener i henhold til ABO-systemet..

    Isohemmagglutinerende serum er en kombinasjon av spesielle antistoffer mot de ytre partiklene i røde blodlegemer. Hvis det er et kompatibelt antigen som antistoffer kan virke på, dannes et kompleks som fremmer utbruddet av en immunbeskyttende mekanisme. Som et resultat av dette skjer liming av røde blodlegemer (agglutinasjon). Hvis dette skjer, blir det konkludert med en inkompatibilitet av blod.

    Disse serumene er laget av blod fra givere i henhold til et spesielt system, som innebærer ekstraksjon av plasma, som inneholder antistoffer, hvoretter det fortynnes med isotonisk - natriumklorid, dette foregår i flere trinn:

    • 1 ml vann helles i beholderen, hvor 0,9% vanlig salt er oppløst.
    • Den samme mengden fortynnet plasma blir tilsatt til det samme røret..
    • Deretter føres 1 ml av denne væsken inn i en beholder med isotonisk.

    Prosessen lar deg få et forhold på 1: 256. Hvis avlsprosedyren brytes, er det stor sannsynlighet for å oppnå feilaktige resultater.

    Gjennomføre forskning

    0,1 ml av hvert serum tilføres overflaten av tabletten i området der ønsket merke blir påført. Deretter tas et testblodvolum på 0,01 ml for hver prøve. Og så blandes hver dråpe serum med blod.

    Fem minutter senere stilles en diagnose. Testing anses som positiv hvis agglutineringsreaksjonen har passert. Basert på resultatene fra analysene er det bygget en tabell der de legges inn.

    Tabell over blodgruppetestresultater ved bruk av standardsera.

    Kryssreaksjonsteknikk

    I dette tilfellet, bruk syklon for å bestemme agglutinogen. Ellers standard sera med parallell avklaringsteknologi takket være referanse røde blodlegemer.

    Disse to metodene ligner veldig på hverandre. Men det er fortsatt forskjeller.

    På en overflate som forskjellige serum tidligere er plassert påføres en liten dråpe vanlige røde blodlegemer. Deretter blir blodet separert i fraksjoner ved bruk av en sentrifuge. Og de formede elementene tilsettes standard serum, og plasmadelen tilsettes standard erytrocyttceller. Evaluering av resultatene blir utført etter fem minutter, og indikatorene er notert i tabellen.

    Takket være denne teknikken elimineres forskningsfeil..

    Den sykloniske metoden

    Hvis det ikke er mulig å bestemme blodgruppen med standard sera, bruk denne teknikken.

    Tsoliklon - hybridantistoffer som er oppnådd fra mus-blod-v-lymfocytter.

    Diagnosesekvensen er som følger:

    1. Etter merking av nettbrettet, som tilsvarer typen syklon, påføres en løsning.
    2. En dråpe diagnostisert blod blir lagt til hver prøve av cyclicolon..
    3. Evaluering av resultatene på fem minutter.
    4. For denne teknikken må spesielle forhold overholdes. Disse inkluderer egnethet for sykloner, romtemperatur og fuktighetsnivå..

    Resultatene fra analysene anses som positive når agglutineringsreaksjonen blir observert når disse fraksjonene blandes. Hvis dette skjedde i to prøver, antas det at blodet tilhører den fjerde gruppen. Hvis reaksjonen ikke overholdes i det hele tatt, så til den første. Diagnostiske feil i denne teknikken er ikke vanlige.

    Rask måte "Erythrotest"

    Ovennevnte metoder har blitt brukt i medisin i lang tid og er vanlige over hele verden. Men med tanke på at industrien stadig utvikler seg, innføres raske diagnostiske metoder for å etablere tilknytning til blodgrupper. Eritrotest regnes også som en slik innovasjon..

    For å bestemme indikatoren på denne måten, må du ha følgende utstyr:

    • Fem-brønns standard plate
    • Scarifier for punktering og mottak av biologisk væske
    • Glasspipette med en gummipære
    • Reagensoppsamlingspipette
    • Blanding av pinner

    Den største fordelen med erytrotesten er at studien ikke krever ytterligere betingelser og er tilgjengelig på et tidspunkt der standarddiagnostikk ikke er mulig.
    Sekvens
    I utsparingene av tabletten er syklonisk plassert til antigener av overflatetypen og hoveddelen, som er ansvarlig for den arvelige overføringen av Rh-faktoren. Et kontrollserum blir lagt til den siste brønnen, noe som vil utelukke et feilaktig resultat og indikere riktig tilhørighet til en bestemt gruppe.

    Evaluering av analyseresultatene blir utført ved bruk av tabellen, den indikerer mulige testresultater..

    ABO-klassifisering

    Blodtype, bestemmelsen blir utført på grunnlag av spesialutviklede standarder. Det er en spesifikk tabell som kjennetegner hver blodgruppe.

    Det Er Viktig Å Være Klar Over Dystoni

    Om Oss

    Årsaker til forhøyede blodplater i blodetKirurgi er årsaken til økningen i antall blodplaterBlodplater er celler som beskytter kroppen mot vaskulære skader. De forhindrer penetrering av sykdomsfremkallende mikrober og utvikling av blødning, og danner en kork som blokkerer skaden.